【關(guān)鍵詞】 補骨脂藥材；,,總呋喃香豆素；,,紫外分光光度法
 
♣ 目的建立紫外分光光度法測定補骨脂藥材中總呋喃香豆素的含量,方法補骨脂藥材粉末經(jīng)索氏提取2 h，過聚酰胺柱后，采用紫外分光光度法，檢測波長為245 nm對補骨脂藥材中的總呋喃香豆素進行測定。結(jié)果采用該方法可準(zhǔn)確測定補骨脂藥材中總呋喃香豆素的含量，補骨脂素在1.008～10.08μl/ml范圍內(nèi)吸光度與濃度的線性關(guān)系良好，樣品平均回收率為98.7%，精密度RSD為0.11%，重復(fù)性RSD為2.8%，穩(wěn)定性RSD為0.75%（4 h內(nèi)）。
♣ 結(jié)論該方法簡單、準(zhǔn)確，可用于補骨脂藥材中總呋喃香豆素的含量測定。
♣關(guān)鍵詞：補骨脂藥材； 總呋喃香豆素； 紫外分光光度法
♣Determination of the Total Furanocoumarins in Fructus Psoraleae by UV Spectrophotometry．
♣Abstract：ObjectiveTo establish a UV spectrophotometry for determination of the total furanocoumarins in Fructus Prosraleae. MethodsThe powder of Fructus Psoraleae was extracted by CH3OH for two hours and puerariaed by polyamide column chromatography ;when it was determined by UV spectrophotometry, wave length was 245 nm.ResultsThe method had good linear relationship from 1.008μl/ml to 10.08 μl/ml,and the recovery rate was 98.7%．The relative standard deviation of accurate test and stability test were 2.8%and 0.75% respectively.ConclusionThe method is simple and accurate, and can be used for determination of the total furanocoumarins in Fructus Psoraleae.
♣　Key words： Fructus Psoraleae； Total furanocoumarins； UV spectrophotometry ．
♣　補骨脂為豆科植物補骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果實。補骨脂味辛，苦，歸腎、脾經(jīng)。
♣　具有溫腎補陽、納氣、止瀉之功效［1］。用于陽痿遺精，遺尿尿頻，腰膝冷痛，腎虛作喘，五更泄瀉；外用治白癜風(fēng)、斑禿。呋喃香豆素類為補骨脂的主要活性物質(zhì)，用于治療白癜風(fēng)、多種婦科出血、鼻、牙齦出血及類血友病出血等癥［2］；同時有一定的抗癌活性及對成骨細(xì)胞的增殖作用。
♣　由于補骨脂中呋喃香豆素類成分無酚羥基，而其他成分包括擬雌內(nèi)酯類，補骨脂黃酮類及單萜酚類成分均有酚羥基，故采用聚酰胺柱色譜對補骨脂藥材中的呋喃香豆素進行富集，以補骨脂素為對照品，建立了用紫外分光光度法測定總呋喃香豆素含量的方法，結(jié)果表明該方法簡便、準(zhǔn)確，可用于補骨脂藥材中總呋喃香豆素含量測定。
♣　儀器與試藥：UV1601型可見紫外分光光度計（日本島津），AW220型電子天平（日本島津），補骨脂素對照品、異補骨脂素對照品（中國藥品生物制品檢定所），聚酰胺粉（30～60目）。
♣　方法與結(jié)果：供試品溶液的制備：上柱樣品的制備取補骨脂藥材粉末（過三號篩）0.5 g，精密稱定，置索氏提取器中，加甲醇適量，加熱回流提取2 h，過濾，加0.5 g聚酰胺粉（30～60目）拌勻，即得。
♣　乙醇洗脫濃度的考察將樣品上聚酰胺柱（10 ml 30~60目聚酰胺，1×10 cm），水洗脫至無色，再依次以30%,50%,70%乙醇各洗脫100 ml，洗脫液進行紫外全波長掃描，圖譜見圖1~5。
♣　由上圖可以看出，30%乙醇洗脫液的紫外掃描圖吸收波長為245 nm，與補骨脂素及異補骨脂素等呋喃香豆素的紫外掃描圖基本一致；50%乙醇洗脫液顯示為補骨脂酚的紫外吸收圖；而70%洗脫液顯示為黃酮及擬雌內(nèi)酯類紫外吸收。
♣圖1 30%乙醇洗脫液（略） 
♣圖2 50%乙醇洗脫液（略）
♣圖3 70%乙醇洗脫液 （略） 
♣圖4 補骨脂素（略）
♣圖5 異補骨脂素 （略）
♣　乙醇洗脫用量的考察將樣品上聚酰胺柱，加水洗脫至無色，再加30%乙醇洗脫以 10 ml/min洗脫，每25 ml為分，取1 ml稀釋至10 ml，在245 nm處測定吸光度。結(jié)果見表1。
♣　表1 樣品30%乙醇洗脫液不同流分的紫外吸收（略）由上表可以看出，第10個流分所檢測到的吸光度已很低，故樣品上聚酰胺柱后，加水洗脫至無色，用30%乙醇以10 ml/min洗脫250 ml即得。
♣　結(jié)論根據(jù)實驗結(jié)果，最終確定補骨脂藥材供試品制備方法為取補骨脂藥材粉末0.5 g（過三號篩），精密稱定，置索式提取器中，加甲醇適量，加熱回流提取2 h，過濾，濾液加0.5 g聚酰胺粉（30～60目）拌勻，揮干，上聚酰胺柱，以30%乙醇洗脫250 ml。
♣　對照品溶液的配置取補骨脂對照品12.6 mg精密稱定，加甲醇超聲，定容至50 ml，再精密吸取1 ml，加甲醇定容至25 ml即得標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
♣　標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密吸取上述對照品溶液1，3，5，7，10 ml，加甲醇定容至10 ml，于245 nm處測定吸收度,.并以吸光度與對照品濃度進行回歸,得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程y=0.132 1x 0.008 8，r=0.999 7（n=5）。實驗表明補骨脂素在1.008～10.08 μg/ml濃度范圍內(nèi)與吸光度呈良好的線性關(guān)系。
♣　精密度實驗精密吸取上述對照品溶液1 ml，加甲醇稀釋至10 ml，于245 nm處測定吸光度，連續(xù)測定5次，結(jié)果表明5次測定的RSD為0.11%，故儀器精密度良好。
♣　穩(wěn)定性實驗將精密度考察項下對照品溶液于0，6，12，24，48 h在245 nm處測定吸光度，實驗結(jié)果表明RSD為0.75%，對照品溶液在4 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。
♣　重復(fù)性實驗按照擬定的含量測定方法，取同一批藥材5份，每份0.5 g，分別制備樣品，測定吸光度，并計算其含量，實驗結(jié)果5個樣品含量RSD為2.9%，表明本法重復(fù)性良好。
♣　回收率實驗取已知含量的補骨脂藥材0.25 g，精密稱定，分別精密加入補骨脂素對照品溶液適量（3種不同水平，各2份），按供試品制備方法處理，進行含量測定，計算回收率。結(jié)果見表2。
♣　表2 回收率實驗（略）由表2可知，3種水平6次實驗的加樣回收率測定結(jié)果均在95%～105%之間，其平均值為98.7%，RSD為1.00%。
♣　樣品測定 取6批補骨脂藥材，每批0.5 g（過三號篩選），按供試品制備方法制備，測定吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中總呋喃香豆素的含量結(jié)果見表3。
♣　表3 6批補骨脂藥材含量測定結(jié)果（略）從表3可知，補骨脂藥材中總呋喃香豆素的含量在1%左右，各個批次藥材之間總呋喃香豆素的含量有較大的差異。
♣　討論：補骨脂中總呋喃香豆素是補骨脂中的主要活性物質(zhì)，補骨脂中呋喃香豆素沒有酚羥基，在聚酰胺柱上的吸附能力較補骨脂中的其他成分如黃酮類、擬雌內(nèi)酯類及單萜酚類為弱。
♣　根據(jù)這一特性，我們通過聚酰胺柱色譜對補骨脂藥材中的呋喃香豆素進行了富集，并對乙醇洗脫的濃度與用量進行了考察。
♣　結(jié)果以藥材提取液拌聚酰胺，上柱，水洗至無色，再以30%乙醇洗脫250 ml作為供試品溶液；以補骨脂素為對照品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線測定樣品中總呋喃香豆素含量，該方法靈敏度高，重復(fù)性好。
♣　根據(jù)擬定的方法，我們測定了6個不同批次藥材中中呋喃香豆素的含量，發(fā)現(xiàn)各個批次藥材含量有較大的差別，故有必要通過總呋喃香豆素。